裸鼠作為免疫缺陷動(dòng)物模型的"黃金標(biāo)準(zhǔn)"，其健康狀態(tài)直接決定腫瘤造模的成敗。在開(kāi)展皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)前，科學(xué)規(guī)范的飼養(yǎng)管理是確保模型穩(wěn)定性與數(shù)據(jù)可靠性的核心前提。將系統(tǒng)梳理SPF級(jí)裸鼠從接收檢疫到實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備的全流程要點(diǎn)，結(jié)合最新文獻(xiàn)與實(shí)操經(jīng)驗(yàn)，構(gòu)建一套可落地的飼養(yǎng)管理體系，助您規(guī)避90%的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)。
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一、飼養(yǎng)環(huán)境構(gòu)建：
1.1 硬件設(shè)施的核心配置
- 屏障系統(tǒng)選擇：優(yōu)先采用IVC獨(dú)立通氣籠具（每籠飼養(yǎng)密度≤5只/籠），氣流速度控制在0.1-0.2m/s，壓力梯度維持在10-15Pa正壓，確?？諝饨?jīng)HEPA過(guò)濾
- 環(huán)境參數(shù)控制：溫度24±2℃、濕度50±10%、光照周期12h/12h。
- 消毒滅菌程序：籠具每周高壓滅菌1次（121℃，30min），墊料選用γ射線滅菌的玉米芯墊料（每籠鋪設(shè)厚度≥2cm），飲水瓶與飼料罐每日75%酒精擦拭消毒。
1.2 嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入與操作規(guī)范
- PPE穿戴標(biāo)準(zhǔn)：二更室更換無(wú)菌服→三層手套（內(nèi)層PE手套，中層乳膠手套，外層丁腈手套）→護(hù)目鏡+口罩+鞋套，確保無(wú)皮膚暴露。
- 操作動(dòng)線設(shè)計(jì)：清潔區(qū)（飼料/墊料存放）→緩沖區(qū)（物品傳遞）→飼養(yǎng)區(qū)（籠具操作）→污物區(qū)（廢棄物處理），單向流動(dòng)避免交叉污染。
二、裸鼠接收與檢疫
2.1 動(dòng)物接收的關(guān)鍵檢查項(xiàng)
- 外觀健康評(píng)估：運(yùn)輸盒開(kāi)箱后立即觀察裸鼠狀態(tài)——正常裸鼠應(yīng)表現(xiàn)為活潑好動(dòng)，皮膚光滑無(wú)紅斑/脫毛，呼吸平穩(wěn)（呼吸頻率60-120次/分鐘），肛門周圍無(wú)糞便污染。
- 關(guān)鍵指標(biāo)記錄：使用電子天平稱重（5-6周齡裸鼠正常體重16-23g，每日體重波動(dòng)應(yīng)≤5%），記錄耳標(biāo)編號(hào)與供應(yīng)商提供的動(dòng)物質(zhì)量合格證（需包含微生物檢測(cè)報(bào)告）。
2.2 檢疫期管理（至少3天）
- 隔離飼養(yǎng)：檢疫期間單獨(dú)放置于檢疫籠架，與存量動(dòng)物保持物理隔離，每日觀察2次（上午9時(shí)/下午4時(shí)），重點(diǎn)監(jiān)測(cè)是否出現(xiàn)"三減一增"癥狀（采食量減少、活動(dòng)量減少、體重減輕，呼吸頻率增加）。
- 適應(yīng)性喂養(yǎng)：前3天提供過(guò)渡飼料，第4天起更換為實(shí)驗(yàn)用輻照滅菌飼料（蛋白質(zhì)含量≥18%，脂肪含量≤4%），自由采食。
三、日常飼養(yǎng)管理：
3.1 飼料與飲水的無(wú)菌保障
- 飼料管理：4℃冷藏保存滅菌飼料，開(kāi)封后24小時(shí)內(nèi)使用完畢，剩余飼料密封后-20℃凍存（保質(zhì)期≤7天），禁止投喂過(guò)期或受潮飼料。
- 飲水處理：采用無(wú)菌純凈水，每2天更換1次，可添加0.1%維生素C（抗氧化作用），但禁止添加抗生素（易導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)）。
3.2 籠具維護(hù)與環(huán)境監(jiān)控
- 換籠操作：每周換籠2次（間隔不超過(guò)4天），換籠時(shí)動(dòng)作輕柔（避免裸鼠應(yīng)激性脫毛），新舊籠具位置不變（減少環(huán)境應(yīng)激）。
- 環(huán)境監(jiān)測(cè)：每日記錄溫濕度，每月進(jìn)行一次浮游菌檢測(cè)（菌落數(shù)≤10CFU/m³），每季度開(kāi)展一次病毒抗體檢測(cè)（重點(diǎn)監(jiān)測(cè)鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒）。
3.3 健康監(jiān)測(cè)與異常處理
- 日常觀察表：
| 監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 |
正常指標(biāo) |
異常信號(hào) |
| 皮膚狀態(tài) |
粉紅色，彈性良好 |
蒼白（貧血）、黃疸（肝功能異常） |
| 眼睛分泌物 |
無(wú)或少量清亮分泌物 |
膿性分泌物（結(jié)膜炎） |
| 糞便形態(tài) |
橢圓形，褐色，質(zhì)地較硬 |
稀便（腹瀉）、血便（腸道出血） |
| 被毛狀態(tài) |
無(wú)被毛但皮膚光滑 |
皮屑增多（真菌感染） |
- 異常處置流程：發(fā)現(xiàn)異常裸鼠立即隔離→標(biāo)記"可疑病鼠"→通知獸醫(yī)檢查→確診傳染病時(shí)全群淘汰并徹底消毒飼養(yǎng)間。
四、造模前準(zhǔn)備：確保動(dòng)物狀態(tài)最佳化
4.1 造模前1周的飼養(yǎng)調(diào)整
- 單籠適應(yīng)性：造模前7天將裸鼠轉(zhuǎn)入實(shí)驗(yàn)籠具單籠飼養(yǎng)，減少群養(yǎng)導(dǎo)致的打斗應(yīng)激。
- 體重篩選：造模前24小時(shí)稱重，剔除體重低于16g或高于23g的個(gè)體，同一批次裸鼠體重標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)≤10%。
4.2 關(guān)鍵生理指標(biāo)確認(rèn)
- 體溫監(jiān)測(cè)：使用紅外測(cè)溫儀測(cè)定肛溫（正常體溫36.5-37.5℃），體溫過(guò)低（＜36℃）提示可能存在感染或營(yíng)養(yǎng)不良。
- 腸道健康評(píng)估：觀察糞便含水量。
五、常見(jiàn)問(wèn)題解決方案與風(fēng)險(xiǎn)防控
5.1 飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)問(wèn)題
- 濕度不足導(dǎo)致的皮膚干燥：在籠具內(nèi)放置滅菌水凝膠（每日更換），維持濕度在55-60%，同時(shí)增加換籠頻率至每3天1次。
- 空氣污染引發(fā)的呼吸道癥狀：立即更換高效過(guò)濾器（HEPA濾芯壽命通常為6個(gè)月），加強(qiáng)通風(fēng)系統(tǒng)維護(hù)，確保換氣次數(shù)≥15次/小時(shí)。
5.2 動(dòng)物健康相關(guān)問(wèn)題
- 鼠肝炎病毒感染：典型癥狀為皮膚黃疸、弓背、體重驟降（每日減重＞1g），一旦發(fā)現(xiàn)立即全群淘汰，飼養(yǎng)間用過(guò)氧乙酸熏蒸消毒（濃度0.5g/m³，密閉24小時(shí)）。
- 應(yīng)激性拒食：更換為適口性更好的半流質(zhì)飼料（滅菌飼料+無(wú)菌水按1:1混合），必要時(shí)灌胃營(yíng)養(yǎng)劑。
六、必須記錄的10項(xiàng)核心數(shù)據(jù)
1. 每日溫濕度曲線
2. 每籠裸鼠體重變化（每周2次，精確到0.1g）
3. 飼料消耗量（每籠每日記錄，正常采食量5-7g/只/天）
4. 異常行為發(fā)生時(shí)間與處置措施
5. 籠具更換與消毒記錄
6. 人員進(jìn)出飼養(yǎng)區(qū)時(shí)間與操作內(nèi)容
7. 微生物檢測(cè)結(jié)果
8. 光照周期執(zhí)行情況
9. 飲水更換頻率
10. 動(dòng)物死亡/淘汰記錄
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